La cytométrie en flux, via les cytomètres FACS Melody et Accuri C6 Plus, développés par BD Biosciences, permet l’analyse multiparamétrique et, pour le FACS Melody, le tri de populations cellulaires d’intérêt à partir d’échantillons complexes. Ces systèmes reposent sur la détection optique de fluorochromes et autorisent une caractérisation fine des propriétés phénotypiques, fonctionnelles et métaboliques des cellules à l’échelle unicellulaire.

Accuri C6 Plus
Ce cytomètre de cellules est équipé de 2 lasers : 488 nm (bleu) et 640 nm (rouge). Il permet de distinguer jusqu’à 4 couleurs. Il est également doté d’un passeur de plaques 96 puits motorisé, permettant d’automatiser la lecture de fluorescence et de réaliser des phénotypages étendus.
Configuration :
• Laser 488 nm :
o 533 nm ± 30
o 585 nm ± 40
o 670 nm (long pass)
• Laser 640 nm :
o 675 nm ± 25

Dans le cadre de l’étude du stress oxydant, ces cytomètres sont utilisés pour la mesure des espèces réactives de l’oxygène (ROS) après marquage spécifique au DCFDA (peroxyde d’hydrogène), à la DHE (ions superoxyde) et au MitoSOX® (ions superoxyde mitochondriaux), permettant une quantification précise et comparative des niveaux de ROS au sein de populations cellulaires définies.

Par ailleurs, ces instruments sont pleinement intégrés à l’analyse du métabolisme énergétique cellulaire via la technologie SCENITH, qui repose sur l’évaluation de la synthèse protéique en conditions d’inhibition ciblée des voies métaboliques. Cette approche permet de déterminer, par cytométrie en flux, la contribution relative de la glycolyse et de la phosphorylation oxydative à la production d’énergie, offrant ainsi une lecture fonctionnelle et quantitative de la plasticité métabolique des cellules, compatible avec des analyses phénotypiques simultanées et le tri de sous-populations spécifiques.

Financeur : Les Sapins de l’Espoir contre le cancer

Modalités d’utilisation : Uniquement en prestation